Caracterización de Escherichia coli D7111 productora de ß-LACTAMASA TEM-176 / Characterization of Escherichia coli D7111 producing the ß-LACTAMASA TEM-176

RESUMEN El presente reporte es la descripción original de bla TEM-176. Se caracterizaron los mecanismos de resistencia a antimicrobianos de un aislamiento de Escherichia coli enterotoxigénica, determinándose la resistencia a 22 antimicrobianos categorizados en 15 grupos diferentes mediante difusión en agar, estableciéndose grupo filogenético, mecanismos de resistencia y presencia de integrones de Clase 1 y 2 mediante PCR. Integrones y genes de resistencia a β-lactámicos fueron secuenciados. El aislamiento del grupo filogenético A, mostró resistencia o sensibilidad disminuida a ampicilina, amoxicilina más ácido clavulánico, ácido nalidíxico, ciprofloxacino, estreptomicina, kanamicina, tetraciclina, trimetoprim, sulfisoxazol, cotrimoxazol, azitromicina y nitrofurantoina, detectándose la presencia de bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) y un integron de Clase 2 conteniendo un gen dfrA1. La resistencia a quinolonas se relacionó con la substitución Ser83Ala. La secuencia de TEM mostró la substitución Ala222Val, la cual a la fecha no había sido descrita, reportándose como una nueva β-lactamasa, con el nombre de bla TEM-176.

ABSTRACT The present report is the original description of bla TEM-176. The mechanisms of resistance to antimicrobial agents were determined in an enterotoxigenic Escherichia coli, determining the susceptibility to 22 antimicrobials classified in 15 different groups by agar diffusion and establishing the phylogenetic group, mechanisms of resistance and presence of Class 1 and 2 integrons. Integrons and β-lactam resistance genes were sequenced. The isolate, belonging to phylogenetic group A, showed the presence of resistance or diminished susceptibility to a ampicillin, amoxicillin plus clavulanic acid, nalidíxic acid, ciprofloxacin, streptomycin, kanamycin, tetracycline, trimethoprim, sulfisoxazole, cotrimoxazole, azithromycin and nitrofurantoin, carrying bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) and a Class 2 integron containing a dfrA1 gene. Quinolone resistance was related to the substitution Ser83Ala. The TEM sequencing showed the presence of the new substitution Ala222Val, which led to the description of the new β-lactamase bla TEM-176.

Caracterización de Escherichia coli D7111 productora de ß-LACTAMASA TEM-176 / Characterization of Escherichia coli D7111 producing the ß-LACTAMASE TEM-176

RESUMEN El presente reporte es la descripción original de bla TEM-176. Se caracterizaron los mecanismos de resistencia a antimicrobianos de un aislamiento de Escherichia coli enterotoxigénica, determinándose la resistencia a 22 antimicrobianos categorizados en 15 grupos diferentes mediante difusión en agar, estableciéndose grupo filogenético, mecanismos de resistencia y presencia de integrones de Clase 1 y 2 mediante PCR. Integrones y genes de resistencia a β-lactámicos fueron secuenciados. El aislamiento del grupo filogenético A, mostró resistencia o sensibilidad disminuida a ampicilina, amoxicilina más ácido clavulánico, ácido nalidíxico, ciprofloxacino, estreptomicina, kanamicina, tetraciclina, trimetoprim, sulfisoxazol, cotrimoxazol, azitromicina y nitrofurantoina, detectándose la presencia de bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) y un integron de Clase 2 conteniendo un gen dfrA1. La resistencia a quinolonas se relacionó con la substitución Ser83Ala. La secuencia de TEM mostró la substitución Ala222Val, la cual a la fecha no había sido descrita, reportándose como una nueva β-lactamasa, con el nombre de bla TEM-176.

ABSTRACT The present report is the original description of bla TEM-176. The mechanisms of resistance to antimicrobial agents were determined in an enterotoxigenic Escherichia coli, determining the susceptibility to 22 antimicrobials classified in 15 different groups by agar diffusion and establishing the phylogenetic group, mechanisms of resistance and presence of Class 1 and 2 integrons. Integrons and β-lactam resistance genes were sequenced. The isolate, belonging to phylogenetic group A, showed the presence of resistance or diminished susceptibility to a ampicillin, amoxicillin plus clavulanic acid, nalidíxic acid, ciprofloxacin, streptomycin, kanamycin, tetracycline, trimethoprim, sulfisoxazole, cotrimoxazole, azithromycin and nitrofurantoin, carrying bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) and a Class 2 integron containing a dfrA1 gene. Quinolone resistance was related to the substitution Ser83Ala. The TEM sequencing showed the presence of the new substitution Ala222Val, which led to the description of the new β-lactamase bla TEM-176.

Corynebacterium pseudotuberculosis biovar ovis: evaluación de la sensibilidad antibiótica in vitro / Corynebacterium pseudotuberculosis biovar ovis: Evaluation of antibiotics susceptibility in vitro

Resumen Los objetivos de este trabajo fueron estudiar la sensibilidad antibiótica de aislamientos de Corynebacterium pseudotuberculosis procedentes de pequeños rumiantes e investigar la presencia de integrones que contienen genes de resistencia. Se estudiaron 15 aislamientos de diferentes fuentes por los métodos de difusión y dilución. Por el método de difusión, amoxicilina-clavulánico, ampicilina, cefotaxima, cefoxitina, ciprofloxacina, cloranfenicol, eritromicina, estreptomicina, gentamicina, imipenem, kanamicina, norfloxacina, penicilina, rifampicina, tetraciclina, trimetroprima-sulfametoxazol y vancomicina fueron activos frente al 100% de los aislamientos, mientras que amicacina presentó resultados variables. En los aislamientos que desarrollaron frente a amicacina se investigó la presencia de integrones de clase 1. El resultado fue negativo, sugiriendo la ausencia del integrón. Utilizando el método de dilución, los antibióticos más activos correspondieron a los grupos de cefalosporinas, gluco-péptidos, macrólidos, quinolonas y tetraciclinas. Se demostró menor actividad de p-lactámicos y aminoglucósidos. No se registró variabilidad en los perfiles antibióticos en los aislamientos procedentes de diferentes fuentes.

Abstract The aims of this work were to study the antibiotic susceptibility in Corynebacterium pseudotuberculosis isolated from small ruminants and to determine the presence of integrons that contain resistance genes. Fifteen isolates of different sources were analysed using the diffusion and the dilution methods. When the diffusion method was performed, amoxicillin-clavulanic, ampicillin, cefotaxime, cefoxitin, ciprofloxacin, chloramphenicol, erythromycin, streptomycin, gentamicin, imipenem, kanamycin, norfloxacin, penicillin, rifampicin, tetracycline, trimethoprim-sulfamethoxazole and vancomycin were effective against the 100% of isolates, while amikacin showed variable results. The isolates that were able to grow with amikacin, were studied in relation to the presence of integron class 1. The result was negative, suggesting the absence of integron. Using dilution method, the antibiotics belonging to the cephalosporin, glycopeptide, macrolide, quinolone, and tetracycline groups were the most active ones for the C. pseudotuberculosis biovar ovis isolates. Less activity of p-lactam and aminoglycosides were observed. There was no observation of variability in the antibiotic patterns in the strains coming from different sources.

Presencia de integrones clase I en Escherichia coli aislada de productos cárnicos en plantas Tipo Inspección Federal (TIF) en el Estado de México / Presence of class I integrons in Escherichia coli isolated from meat products in Federal Inspection Type (TIF) plants in the Estado de Mexico

Meat foods are the main vehicle of foodborne diseases as a result of poor handling during processing. The objective of this study was to determine the frequency and antibiotic resistance factors of Escherichia coli in TIF plants of the Estado de Mexico. For this, 3 Federal Inspection Type (TIF) plants in Mexico were analyzed, with n = 90 samples, 10 raw meat product (beef, pork and turkey meat), 10 finished meat product and 70 work tools. Eighteen (20%) E. coli strains were isolated (3 raw meat product, 2 finished meat products and 13 work tools (P > 0.05). The E. coli isolates showed high levels of resistance to ampicillin (88.8%), cephalothin (88.8%), carbenicillin (83.3%) and chloramphenicol (61.1%). There was a relationship between E. coli strains resistant to ampicillin and chloramphenicol and presence of resistance genes Pse-1 4/18 (22%) and floR 4/18 (22%). Five (55.5%) positive isolates to Pse-1 and floR, also exhibit the Cs3 Cs5 genes for the class I integrons. The results indicate that antimicrobial resistance and genetic resistance factors are present in Escherichia coli isolated from food processing plants, suggesting that they can be transmitted to the intestine microbiota of human population by contamination and consumption of improperly processed products and become a risk factor for public health.

Los alimentos cárnicos constituyen uno de los principales vehículos de enfermedades transmitidas por alimentos, como consecuencia de un manejo deficiente durante su procesamiento. El objetivo del presente trabajo fue determinar la frecuencia de algunos factores de resistencia antibiótica de Escherichia coli en plantas Tipo Inspección Federal (TIF) del Estado de México. Para este fin se analizaron muestras de tres plantas TIF en el Estado de México (n = 90), 10 de materia prima (carne de bovino, cerdo y pavo), 10 de producto terminado y 70 de utensilios de trabajo. Se aislaron 18 (20%) cepas de E. coli, 3 de materia prima, 2 de producto terminado y 13 de utensilios de trabajo (P > 0.05). Las E. coli aisladas presentaron una frecuencia alta de resistencia a ampicilina (88.8%), cefalotina (88.8%), carbencilina (83.3%) y cloranfenicol (61.1%). Se encontró una relación entre las cepas de E. coli resistentes a ampicilina y cloranfenicol y la presencia de genes de resistencia Pse-1 4/18 (22%) y floR 4/18 (22%). Cinco (55.5%) aislamientos positivos a Pse-1 y floR también presentaron el gen Cs3 Cs5 del integrón clase I. Los resultados indican que la resistencia antimicrobiana y los factores de resistencia genéticos están presentes en Escherichia coli aislada de plantas procesadoras de alimentos, lo que sugiere que estos elementos pueden transmitirse a la microbiota intestinal de la población humana a través de la contaminación y consumo de productos mal procesados, y ser un factor de riesgo para la salud pública.

Metalo beta lactamasas: el fin de los beta lactámicos? / Metallo beta lactamases: the end of beta lactams?

Uno de los grupos de antibióticos más importantes, es el grupo de los beta-lactámicos. Para ejercer su acción antimicrobiana los beta-lactámicos requieren penetrar la pared celular y atacar las Proteínas Ligadoras de Penicilinas (Penicilin Binding Proteins: PBP). El mecanismo más utilizado por los bacilos Gram negativos para adquirir resistencia a beta-lactámicos, es la inactivación de las drogas por las enzimas beta-lactamasas. La producción de beta-lactamasas tipo carbapenemasas es un mecanismo de resistencia de gran importancia. Estas enzimas, codificadas por genes que en su mayoría están localizados en elementos genéticos tales como los integrones o insertados en elementos móviles como transposones y plásmidos, se han extendido rápidamente entre los agentes patógenos de importancia clínica, como Enterobacterias, P. aeruginosa y A. baumanii. Las metalo-beta-lactamasas (MbetaL) pertenecientes al grupo B de Ambler y el grupo 3 de Bush, poseen cuatro características principales: (i) Poseen actividad contra los carbapenemes, (ii) No hidrolizan los monobáctamicos como el aztreonam, (iii) Son inhibidas por quelantes como el EDTA o el Mercapto acetato de Sodio; y (iv) Requieren cationes +2 divalentes, generalmente Zn como cofactor para su actividad catalítica. La aproximación de un disco conteniendo un agente quelante a uno que contiene un carbapeneme podría resultar una herramienta útil para la detección de MbetaLs. El efecto sinérgico entre los carbapenemes [imipenem (IPM) y/o meropenem (MEN)] y el agente quelante sería indicativo de la presencia de MbetaL. La aparición de metalo-beta-lactamasas como una amenaza sustancial a la salud debe impulsar a las autoridades de salud para formular un plan de contención, para su implementación a nivel nacional. Este plan debe asegurar la detección temprana de casos, la vigilancia permanente de brotes y una estrategia en entornos con presencia espor dica o ausencia completa de productores metalo-beta-lactamasa.

One of the most important groups of antibiotics, is the group of beta-lactams. To exert its antimicrobial action the beta-lactam require penetrate and attack the cell wall Penicillin Binding Proteins (PBP). The mechanism used by Gram negative bacilli to acquire resistance tobeta-lactams, is drug inactivation by beta-lactamase enzymes. The production of beta-lactamase carbapenemases is a resistance mechanism of great importance. These enzymes encoded by genes that are located mostly in genetic elements such as integrons or inserted in mobile elements such as transposons and plasmids, have spread rapidly among clinically important pathogens such as Enterobacteriaceae, P. aeruginosa and A. baumannii. The metallo-beta-lactamases (MbetaL) in group B and group 3 Ambler Bush, have four main characteristics: (i) possess activity against carbapenems, (ii) not hydrolyze monobactams like aztreonam, (iii) are inhibited by chelating agents such as EDTA or sodium acetate Mercapto and (iv) require divalent cations, usually Zn+2 cofactor for its catalytic activity. The approximation of a disc containing a chelating agent containing one carbapeneme could be a useful tool for detecting MbetaLs. The synergistic effect between carbapenems [imipenem (IPM) and/or meropenem (MEN)] and the chelating agent would be indicative of the presence of MbetaL. The emergence of metallo-beta-lactamase as a substantial threat to health should prompt health officials to develop a plan of containment, for implementation at the national level. This plan should ensure early case detection, continuous surveillance of outbreaks and strategy in environments with sporadic presence or complete absence of metallo-beta-lactamase.

Serovariedades de Salmonella enterica subespecie enterica en porcinos de faena y su resistencia a los antimicrobianos / Serovars of Salmonella enterica subspecies enterica and its antimicrobial resistance in slaughterhouse pigs

Se realizó un estudio para determinar la prevalencia de Salmonella y sus serovariedades en cerdos de faena, para evaluar sus perfiles de resistencia a los antimicrobianos y para conocer la presencia de integrones de clase 1 como posibles reservorios de resistencia. A partir de un total de 386 muestras de porcinos provenientes de cuatro frigoríficos de las provincias de Buenos Aires y de Santa Fe (Argentina), se identificaron 93 (24,1%) cepas de Salmonella enterica subespecie enterica, 52 (55,9%) de contenido cecal y 41 (44,1%) de nódulo linfático ileocecal. Se hallaron 13 serovariedades de S. enterica, las más prevalentes fueron S. Schwarzengrund, S. Heidelberg, S. subespecie I 6,8:e,h:-, S. Derby y S. Bredeney. Se probaron 15 antimicrobianos por el método de dilución en agar: amikacina, gentamicina, ciprofloxacina, cefalotina, cefotaxima, enrofloxacina, fosfomicina, polimixina-B, tetraciclina, cloranfenicol, estreptomicina, trimetoprima-sulfametoxazol, ampicilina, nitrofurantoína y ácido nalidíxico. Según se estableció mediante la determinación de la CIM, el 73% de las cepas de S. enterica subespecie enterica fueron sensibles a todos los antimicrobianos probados. Se observó resistencia a tetraciclina en 24 (25,8%) de las 93 cepas, a cloranfenicol en 22 (23,7%), a estreptomicina en 22 (23,7%) a trimetoprima-sulfametoxazol en 20 (21,5%), a ampicilina en 18 (19,4%), a nitrofurantoína en 3 (3,2%) y a ácido nalidíxico en 3 (3,2%). Algunos aislamientos de S. Typhimurium, S. Heildelberg, S. Derby y S. Orion presentaron multirresistencia y portaban el gen de la integrasa clase 1. Los mayores porcentajes de resistencia correspondieron a los antimicrobianos habitualmente utilizados en veterinaria y en las explotaciones porcinas.

A study was carried out in order to determine the prevalence of Salmonella and its serovars among porcine slaughterhouses, to evaluate the antimicrobial resistance profiles and to know the presence of class 1 integrons as possible reservoir of resistance. From a total of 386 samples from four porcine slaughterhouses of Buenos Aires and Santa Fe Provinces (Argentina), 93 (24,1%) Salmonella enterica subspecies enterica strains were identified, 52 (55,9%) from cecal contents and 41 (44,1%) from ileocecal lymph nodes. Thirteen serovars of S. enterica were found, the most prevalent were: S. Schwarzengrund, S. Heidelberg, S. subspecie I 6,8:e,h:-, S. Derby and S. Bredeney. Fifteen antimicrobials by the agar dilution method were tested: amikacin, gentamicin, ciprofloxacin, cephalotin, cefotaxime, enrofloxacin, fosfomycin, polimixin-B, tetracycline, chloramphenicol, streptomycin, trimethoprim-sulfamethoxazole, ampicillin, nitrofurantoin, and nalidixic acid. According to the CIM determination, 73% Salmonella enterica subspecies enterica strains were sensible to all the antimicrobials tested. Antimicrobial resistance was observed to tetracycline in 24 (25,8%) of 93 strains, to chloramphenicol in 22 (23,7%), to streptomycin in 22 (23,7%), to trimethoprim-sulfamethoxazole in 20 (21,5%), to ampicillin in 18 (19,4%), to nitrofurantoin in 3 (3,2%) and to nalidixic acid in 3 (3,2%). Some isolates of S. Typhimurium, S. Heidelberg, S. Derby, S. Orion showed multidrug resistance and carried the class 1 integrase gene. The highest percentage of resistance corresponded to the antimicrobials currently used in veterinary and porcine farms.

Genética y genómica enfocadas en el estudio de la resistencia bacteriana / Genetics and Genomics for the study of bacterial resistance

La resistencia bacteriana es un problema de salud pública causante de índices elevados de morbi-mortalidad hospitalaria. En la medida en que se usan los diferentes antibióticos se seleccionan bacterias resistentes a múltiples fármacos. El desarrollo de nuevas herramientas moleculares de la genómica y proteómica, como el PCR en tiempo real, pirosecuenciación de ADN, espectrometría de masas, microarreglos de ADN y bioinformática, permite conocer en forma más estrecha la fisiología y estructura de las bacterias y los mecanismos de resistencia a los antibióticos. Estos estudios hacen posible identificar nuevos blancos farmacológicos y diseñar antibióticos específicos para suministrar tratamientos más certeros que combatan las infecciones producidas por bacterias. Con estas técnicas también es posible la identificación rápida de los genes que confieren la resistencia a los antibióticos y el reconocimiento de las estructuras genéticas complejas como los integrones, que intervienen en la diseminación de los genes que producen la multirresistencia.

Bacterial resistance is a public health problem causing high rates of morbidity and mortality in hospital settings. To the extent that different antibiotics are used, bacteria resistant to multiple drugs are selected. The development of new molecular genomic and proteomic tools such as real-time PCR, DNA pyrosequencing, mass spectrometry, DNA microarrays, and bioinformatics allow for more in-depth knowledge about the physiology and structure of bacteria and mechanisms involved in antibiotic resistance. These studies identify new targets for drugs and design specific antibiotics to provide more accurate treatments to combat infections caused by bacteria. Using these techniques, it will also be possible to rapidly identify genes that confer resistance to antibiotics, and to identify complex genetic structures, such as integrons that are involved in the spread of genes that confer multidrug-resistance.

Integrones y su relación con el fenotipo de resistencia en bacilos gramnegativos aislados en el Hospital Torres Galdames de Iquique, Chile / Integrons and their relationship with resistance phenotype in Gram negative bacilli isolated in the Hospital Torres Galdames, Iquique, Chile

La resistencia antimicrobiana es codificada por algunos elementos genéticos que generan un flujo horizontal, particularmente, en ambientes que están sometidos a una fuerte presión selectiva, como ocurre en el ambiente hospitalario. En tal sentido, los bacilos gramnegativos, en el último tiempo, han cobrado importancia como agentes de infección nosocomial. Objetivo. Investigar la presencia de integrones en aislados clínicos de bacilos gramnegativos y su relación con el fenotipo de resistencia, Material y Métodos. Se analizaron 88 aislados clínicos de distintos servicios del Hospital Torres Galdames, durante el período: junio a diciembre de 2004. Fueron identificadas de acuerdo con su perfil bioquímico y se determinó la susceptibilidad a antimicrobianos mediante el método de difusión en agar. La presencia de integrones se detectó mediante RPC. Se realizó un análisis de cluster para estudiar la relación entre el fenotipo de resistencia y la presencia de integrones. Las cepas fueron genotipificadas mediante ERIC-PCR. Resultados. Dieciocho por ciento de las cepas aisladas correspondió a Proteus mirabilis, 17 por ciento a Escherichia coli y 32 por ciento a bacilos gramnegativos no fermentadores. La mayoría de los aislados presentó una elevada resistencia a los antimicrobianos evaluados: ampicilina 83 por ciento, cefalotina 82 por ciento, ceftriaxona 82 por ciento, ciprofloxacina 81 por ciento, gentamicina 81 por ciento y cotrimoxazol 82 por ciento. De las 88 cepas, 75 por ciento presentó integrones, siendo más común la clase 2. Los resultados del análisis de cluster no revelaron una clara relación entre la presencia de éstos y el perfil de resistencia para los antimicrobianos ensayados. Con la información disponible no fue posible relacionar la presencia de integrones con un determinado patrón de resistencia. Los patrones de bandas obtenidos con la técnica de ERIC-PCR revelaron una gran variedad genética entre las cepas analizadas, definiendo...

The antimicrobial resistance is coded in genetic elements which generate a horizontal flow of information, particularly in conditions that are under strong selective pressure like the nosocomial environment. In that sense, in the last decades, gram negative bacilli have become important agents of nosocomial infection. In order to investigate the presence of integrons among clinical isolates of gram negative bacilli and their relationship with their resistance profile, we studied 88 strains isolated from clinical specimens of different wards of the Hospital Torres Galdames, during the June-December period, 2004. They were identified according to biochemical tests. The antimicrobial susceptibility was evaluated by agar diffusion method. The integron presence was investigated by polymerase chain reaction (PCR). A cluster analysis was carried out to study the relationship between the presence of integrons and the resistance profile. The genotyping of the isolates was carried out by ERIC-PCR technique. Results: Of the isolated strains, 18 percent corresponded to Proteus mirabilis, 17 percent to Escherichia coli, and 32 percent to Non Fermentative Gram Negative bacilli. Most isolates presented high resistance to the antibiotics studied: 83 percent to ampicillin, 85 percent to cephalotin, 82 percent to ceftriaxone, 82 percent to ciprofloxacin, 81 percent to gentamycin and 82 percent to cotrimoxazole. Seventy-five percent of the 88 strains presented integrons. Class 2 integrons were found to be the most common. The results of the cluster analysis did not show a clear relationship among the presence of the integrons and the resistance profile. With the available information it is not possible to relate the integron presence with a certain resistance pattern. The patterns of bands obtained with the technique ERIC-PCR revealed a great genetic variety among the analyzed isolations, defining diverse genotypes, distributed in the different services...

PRESENCIA DE INTEGRONES Y SU RELACIÓN CON LA RESISTENCIA A ANTIMICROBIANOS EN CEPAS DE Pseudomonas aeruginosa / PRESENCE OF INTEGRONS AND THEIR RELATIONSHIP WITH ANTIMICROBIAL RESISTANCE IN Pseudomonas aeruginosa STRAINS

Debido a que en nuestro medio existe una carencia de datos estadísticos con respecto a la incidencia de infecciones producidas por P. aeruginosa en la población y la resistencia que presenta frente a una variedad de antimicrobianos, el presente estudio tiene como propósito fundamental aportar información y datos sobre la distribución y frecuencia (previa estandarización de la técnica para la detección) de los integrones clase 1 y 2 y su relación con la multirresistencia a antimicrobianos. Para este fin, se obtuvieron muestras de P. aeruginosa de diferentes laboratorios y hospitales del Departamento, a las que se les realizó la prueba de susceptibilidad antimicrobiana, crecimiento de las bacterias a presión selectiva, extracción de ADN y por último detección de integrones clase 1 y 2 con partidores específicos. De 41 muestras obtenidas de P. aeruginosa. se detectó usando PCR, la presencia de integrones clase 1 y clase 2, identificándose éstos en el 58.5 % de las cepas. El 29.27 % de los aislados, llevaba integrones clase 1, el 12,20 % integrones clase 2 y el 17.07 % llevaba ambas clases de integrones. La asociación entre integrones clase 1 y la resistencia múltiple a antimicrobianos fue estadísticamente significativa (chi-cuadrado 0.0033), demostrando la existencia de una fuerte correlación, caso contrario a lo que ocurrió con la asociación entre integrones clase 2 (chi-cuadrado 0.8528). La autenticidad de los productos obtenidos de la PCR, se confirmaron realizando ensayos de restricción con la enzima SphI y la enzima HaeIII. Este es el primer reporte que muestra la prevalencia de integrones clase 1 y la relación con la multirresistencia en aislados de P. aeruginosa en Cochabamba, Bolivia.

Due to the fact that in our environment there is an absence of statistical data related to the incidence of infections produced by P. aeruginosa in our population and the resistance that it presents with respect to a variety of antimicrobial agents, this study aims basically at providing information and data about distribution and frequency (after having standardized the detection techniques) of the integrons classes 1 and 2, and their relationship with their multi resistance to antimicrobial agents. For this purpase, samples of P. aeruginosa were obtained from different laboratories and hospitals in the State of Cochabamba, which were tested for antimicrobial sensibility, as well as for growth of bacteria under selective pressure, DNA extraction and finally detection of integrons class 1 and 2 with specific primers. Using PCR, integrons class 1 and 2 were detected in 41 samples of P. aeroginosa, identifying these ones in 58.5% of the strains: 29.7% of those isolated, carried integrons class 1, 12.2% had integrons class 2, and 17.07% had integrons of both classes. The association between class 1 integrons and multiple resistance to antimicrobial agents was statistically significant (chi square = 0.0033) thus showing a strong correlation, as opposed to what happened with the association among class 2 integrons (chi square = 0.8528) The authenticity of the products obtained from the PCR was confirmed through restriction tests made with SphI and HaeIII enzymes. This is the first report that shows prevalence of class 1 integrons and the relation with multi resistance aisolated strains of P. aeruginosa in Cochabamba, Bolivia.